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    HCG检测结果不一致的6大原因

    更新时间:2020-03-16 10:14:06  推荐指数:

      人绒毛膜促性腺激素(humanchorionicgonadotropin,HCG)是由滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,由α和β两个亚基组成,α亚基负责与相应受体结合,β亚基发挥生活学活性。由于α亚基与垂体分泌的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和促甲状腺激素(TSH)的α亚基相似,而β亚基则是特异的,因此一般用针对β-HCG的抗体来测定标本中的HCG,以防止出现交叉反应。

    HCG检测结果不一致的6大原因

      因为HCG的浓度与怀孕的进程密切相关,因此常用来诊断早期妊娠、异位妊娠、先兆流产、产后及人工流产术后的监测。临床常用来检测HCG的标本包括血清和尿液两种,而常用的检测方法则有早孕试纸(通常为胶体金法)和发光法的定量检测,通常情况下都是用早孕试纸对尿液标本进行定性检测,而用发光法对血液标本进行定量检测,大多数情况下两者检测结果具有一致性,但也有少数情况下两者结果并不一致,今天就和大家一块学习下两者结果不一致的可能原因。

      两种检测方法的原理

      在分析原因前我们首先看一下两种检测方法的原理,因为搞清楚检测原理对我们理解结果的不一致至关重要。

      首先,我们来看一下早孕试纸也就是胶体金法的检测原理:胶体金法检测HCG

      采用的是双抗体夹心法,由抗β-HCG单克隆抗体和抗鼠的多克隆抗体分别固定于硝酸纤维膜的检测(T)区和质控(C)区,而胶体金标记的抗α-HCG单克隆抗体作为流动相,当标本中含有HCG时,标本中的HCG首先和胶体金标记的抗α-HCG单克隆抗体结合,流动到T区时,和T区的抗β-HCG单克隆抗体结合被固定,造成T线显色,剩余的流动相继续流动到C区与抗鼠的多克隆抗体结合,造成C线显色。

      其次,我们再来看一下发光法的检测原理,不同厂家的发光法原理存在着差异,但基本原理是一样的,都是双抗体夹心法,其中一个抗体固定在相应的固相上(例如磁微粒),另一个为标记抗体,与胶体金法不同的时,两个抗体是针对不同抗原位点的抗β-HCG单克隆抗体。

      虽然胶体金法和发光法均采用双抗体夹心法,但由于所用抗体、标记物、方法学等的不同,二者在检测结果方面存在着差异:

      1、胶体金法是定性方法,而发光法是定量方法;

      2、胶体金法由于用的两种抗体是抗α-HCG单克隆抗体和抗β-HCG单克隆抗体,因此检测的是完整的HCG,而无法检测游离的β-HCG,而发光法使用的是两种不同的抗β-HCG单克隆抗体,除了可以检测完整的HCG,还可以检测游离的β-HCG;

      3、两者的检测敏感度及检测范围不同,胶体金法的检测下限在20-40mIU/ml,而发光法可以检测到1mIU/ml以下,发光法的检测范围也远远大于胶体金法,在HCG浓度很高时,更不容易出现钩端效应。

      HCG结果不一致原因分析

      1、HCG浓度低造成的检测结果不一致

      我们前面提到过胶体金法和发光法的检测下限存在着差异,当标本中的HCG浓度比较低时,会出现发光法阳性而胶体金法阴性的不一致结果。HCG浓度低也存在不同情况,有可能是病人标本中的HCG浓度本身就低,还有可能是人为稀释造成的,例如孕初期病人做B超前要憋尿,大量饮水造成尿液稀释,这时候也会出现尿HCG阴性,而血HCG阳性的情况。

      2、HCG变体造成的检测结果不一致

      在人体内HCG并不是一成不变的,除了规则HCG以外,还存在多种变体,例如:高糖基化hCG、游离β-HCG、游离α-HCG,以及各种不同的hCG碎片,如缺刻分子hCG、缺刻的游离β-HCG、高糖基化游离β-HCG以及在尿中检到的游离β-HCG核心片段。这些HCG变体也会造成检测结果的差异,例如β-HCG核心片段仅在尿液中可以检测到,高浓度的β-HCG核心片段可以产生钩状效应,使尿HCG产生假阴性,而血HCG则不受其影响依然为阳性。

      3、抗体干扰造成的检测结果不一致

      由于现在HCG检测使用的抗体基本上都是鼠源性的单克隆抗体,部分患者由于与小鼠有密切接触或者曾被小鼠咬伤过或者接受过鼠源性抗体治疗,体内存在着针对鼠源性抗体的抗抗体即非特异性的异嗜性抗体这种抗体会与HCG抗体结合,从而产生HCG假阳性。但是,异嗜性抗体分子量较大,无法通过肾小球的机械屏障分泌到尿中,因此不会干扰尿HCG的检测,此时也会产生检测结果的不一致。

      4、钩状效应造成的检测结果不一致

      钩状效应即HOOK效应,是指由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象,其中抗体过量叫做前带效应,抗原过量叫做后带效应。怀孕8-10周时孕妇体内HCG浓度达到峰值,有些孕妇体内HCG浓度可以达到数十万,此时过高的HCG可能会造成检测中出现钩状效应,导致假阴性的出现,由于胶体金法的检测范围较窄,更容易受钩状效应的影响,而发光法检测范围宽,比较不容易受钩状效应的影响,此时也会出现检测结果的不一致。

      5、其他垂体激素干扰造成的检测结果不一致

      由于HCG的α亚基与垂体分泌的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和促甲状腺激素(TSH)的α亚基相似,而β亚基与LH的β亚基结构也非常相似(在121个氨基酸分子中,有97个两者是完全相同的),因此一些高浓度的垂体激素会造成交叉反应,造成检测结果的不一致。但由于现在的检测试剂都是高纯度的抗β-HCG单克隆抗体,这种交叉反应已经非常罕见。

      6、不同试剂不同方法学造成的检测结果不一致

      我们前面提到过检测标本中的HCG是不同HCG变体组成的,分子结构有差异,但有相同抗原性的混合物。不同厂家使用的抗体不同,针对的抗原位点也存在着差异,因此使用不同厂家的试剂也可能造成检测结果的不一致,有些甚至可以相差数十倍。

      上面我们分析了几种造成HCG检测结果不一致的情况,但试剂的临床工作中情况往往要更加复杂,一定要多多与临床交流,根据不同的情况采取不同的检测策略,避免踩到陷阱,让我们的检测结果更加准确。

    HCG检测试剂盒
    HCG检测试剂盒

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